高效液相色谱法测定葡萄中8种氨基甲酸酯农药残留
摘要 使用高效液相色谱法测定葡萄中8种氨基甲酸酯农药（涕灭威亚砜、涕灭威砜、涕灭威、灭多威、克百威、3-羟基克百威、速灭威和仲丁威）的残留量。样品前处理采用乙腈提取、氨基柱净化，C18色谱柱分离、高效液相色谱仪-柱后衍生-FLD检测器分析检测，结果表明：8种氨基甲酸酯农药在30 min内得到良好的分离，线性相关系数r2为0.999 75～0.999 93，检测限达2.5～7.1 μg/kg，当添加水平为0.5 mg/kg时，回收率范围为82.0% ～101.2%。该方法快速灵敏，操作简单且效果显著。
关键词 葡萄；高效液相色谱法；氨基甲酸酯农药；残留量
中图分类号 S481+.8 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2016）08-0117-02
Abstract Investigated a method for determination of 8 carbamate pesticides residue （including：Aldicarb sulfoxide，Aldicarb sulfone，aldicarb，meth-omyl，carbofuran，3-hydroxy g Budweiser，Tsumacide and Bassa） in grape by high performance liquid chromatography（HPLC）.Using acetonitrile to extract，Amino to purify，C18 column to separate and detecting in HPLC-FLD detector.The results showed that 8 carbamate pesticides had fine separated in 30 minutes，the linearly dependent coefficient r2 was between 0.999 75 and 0.999 93，detection limit was 2.5～7.1 μg/kg and the recovery range was 82.0%～101.2% when add level was 0.5 mg/kg.The method was rapid and sensitive，the operation was simple and the effect was remarkable.
Key wors grape；high performance liquid chormatography；carbamate pesticide；residue
葡萄，俗名草龙珠、赐紫樱桃、菩提子、蒲陶、山葫芦，是世界上分布最广的果树作物，作为著名水果，可生食或制葡萄干，或酿酒，酿酒后的酒脚还可提取酒食酸等。我国葡萄生产发展十分迅速，截至2013年，我国葡萄栽培面积已达71.464万hm2，葡萄产量达到1 155万t，产量稳居世界首位[1]。然而，葡萄的农药残留一直是制约产业链发展的重要因素，虽然国内专家指出多年来鲜食葡萄及其产品葡萄酒均未发生过农药残留超标问题，但葡萄市场却依然遭遇着消费者的信任危机。究其原因，是当前国内葡萄的种植多为散户种植，对葡萄的田间管理不规范，导致杀虫剂、杀菌剂等农药过量使用，尤其是在葡萄4个月的生长周期内，农户大致会喷7～8种农药，从而导致葡萄果实中农药残留过高，并牵连到葡萄酒等多种行业的农药残留问题，给我国葡萄产业链的质量安全带来重重隐患[2]。
当前，已有不少著作提出了关于葡萄中农药多残留检测的方法[3-4]，归纳起来，农药残留的检测方法主要集中在气相色谱法（GC）、液相色谱法（LC）、气相色谱-质谱联用法（GC-MS）、气相色谱-串联质谱法（GC-MS/MS）、液相色谱-串联质谱法（HPLC-MS/MS）等[5]。本文采用乙腈提取，固相萃取净化，浓缩定容后仪器检测，使用高效液相色谱-柱后衍生-荧光检测法（HPLC）同时测定8种氨基甲酸酯农药，该方法主要特点是前处理步骤简单，且灵敏度高，分析效果显著。
1 材料与方法
1.1 仪器与试剂
Agilent 1260型高效液相色谱仪，配有FLD检测器，柱后衍生系统（Pickering公司），百分之一天平[奥豪斯仪器（上海）有限公司]，IKA T18匀浆机（IKA公司），圆周式震荡摇床（IKA公司），台式冷冻高速离心机（上海安戈仪器有限公司），氮吹仪（Organomation公司），Autoscience固相萃取仪（天津奥特赛斯仪器有限公司），Poxwar漩涡混合器（苏州珀西尔实验设备有限公司）。
前处理所使用的乙腈、氯化钠、甲醇、二氯甲烷为分析纯，其中氯化钠为广州化学试剂厂生产，其余均为天津市富宇精细化工有限公司生产；最终定容的甲醇为色谱纯，赛默飞世尔科技（中国）有限公司生产；氨基固相萃取小柱（500 mg 6 mL），安捷伦公司生产；0.2 ？滋m尼龙滤膜，天津市津腾实验设备有限公司生产；柱后衍生试剂氢氧化钠溶液、OPA稀释溶液、邻苯二甲醛和巯基乙醇均为Pickering公司生产。
涕灭威亚砜、涕灭威砜、涕灭威、灭多威、克百威、3-羟基克百威、速灭威和仲丁威8种氨基甲酸酯类农药标准品均由农业部环境保护科研监测所生产，浓度均为1 000 mg/L，使用前用甲醇（色谱纯）稀释成所需浓度的混合标准工作液。
1.2 试验方法
1.2.1 样品的前处理。按NY/T 789-2004[6]的标准于中山市三乡镇农场抽取葡萄样品，取全果，经混匀粉碎后制成待测样。
取25.0 g混匀粉碎后的样品置于100 mL离心管中，加入50 mL乙腈，用高速匀浆机匀浆2 min，加入7 g氯化钠，用圆周式震荡摇床剧烈震荡3 min，置于离心机以8 000 r/min离心5 min。