气相色谱—质谱联用法测定番茄中腐霉利农药残留量的不确定度评定
摘 要：本文对采用GB/T19648-2006《水果和蔬菜中500种及相关化学品残留量的测定 气相色谱-质谱法》测定番茄中腐霉利残留量的不确定度进行了评定。通过建立数学模型，分析和评定了标准溶液校准过程、样品质量、体积、样品前处理过程、测试过程随机效应等主要不确定度分量，并计算了测量结果的合成标准不确定度和扩展不确定度。
关键词：不确定度；腐霉利；食品；气相色谱-质谱联用法
中图分类号：S481.8；S641.2 文献标识码：A DOI：10.11974/nyyjs.20170432051
测量不确定度是评定检测和校准水平的重要指标，也是判定检测结果高低的依据。近年来国内外对检测数据的准确性和可靠性提出了更高的要求，检测数据质量的高低需要在国际间得到评价和互认，实验室在日常出具检测报告和认可考核中都会涉及检测结果不确定度的分析和表达问题。实验室能力评价规范性文件ISO 17025：2005《校准和检测实验室能力的通用性要求》明确要求“当不确定度与检测结果的有效性或应用有关，或客户的指令中有要求，或不确定度影响到限度的符合性时，检测报告中需包括有关不确定度的信息” [1]，因此应加强对不同检测领域测量不确定度应用的研究，尤其在涉及国民生命安全保障的食品安全检测领域，更要优先大力开展不确定度方面的工作。
腐霉利（procymidone）（CAS：32809-16-8），又名速克灵、二甲菌核利，是一种新型低毒性杀菌剂[2]。腐霉利作为高效杀菌剂被广泛使用的同时，农药残留的问题也日益突出，欧盟、美国及日本的“肯定列表制度”中规定食品中腐霉利最大残留限量 （MRL）为0.02mg/kg[3-4]，我国国家标准GB 2763-2014《食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量》中规定，番茄、黄瓜、油菜籽中腐霉利残留的限量标准为2.0mg/kg[5]。
本文对采用GB/T19648-2006《水果和蔬菜中500种及相关化学品残留量的测定 气相色谱-质谱法》[6]方法测定番茄样品中腐霉利残留量的不确定度进行评定，分析了测试过程中影响不确定度的因素，建立了数学模型和评定程序，为气相色谱-质谱联用法的不确定度评估提供参考。
1 实验部分
1.1 主要仪器与试剂
气相色谱-质谱联用仪（6890N/5975B，美国安捷伦公司）；电子分析天平（BP211D，德国赛多利斯公司）。标准品，腐霉利标准物质（100.0±0.1μg/mL，农业部环境保护科研检测所）；试剂是甲苯（色谱纯）；乙腈（色谱纯；氯化钠（优级纯）；无水硫酸钠（分析纯）。
1.2 仪器条件
色谱柱，DB-1701（30m×0.25mm×0.25μm）石英毛细
管柱；色谱柱温度程序：40℃保持1min，然后以30℃/min程序升温至130℃，再以5℃/min升温至250℃，再以10℃/min升温至300℃，保持5min；其它条件，载气：氦气，纯度≥99.999%，流速：1.2mL/min；进样口温度：290℃；进样量：1μL；进样方式：无分流进样，1.5min后打开分流阀和隔垫吹扫阀；电子轰击源：70eV；离子源温度：230℃； GC-MS接口温度：280℃；选择离子：283，285，96。
1.3 测定步骤
称取20.00g试样（精确至0.01g）置于80mL离心管中，准确加入40mL乙腈，均质匀浆提取1min，加入5gNaCl，再匀浆提取1min后，3000r/min离心5min，准确移取上清液20mL，经Envi-18柱、Envi-Carb柱/Sep-Pak氨丙基柱净化后旋蒸浓缩至近干，用1mL单标度吸量管将样液最终体积准确定容至1mL，混匀，用于气相色谱-质谱联用仪测定。使用自动进样器吸取1μL 样液上机，以外标法采用峰面积定量积分计算。
用移液管移取1mL 100μg/mL标准溶液至10mL容量瓶中，得到10μg/mL标准储备溶液，再用移液管分别移取0.1mL、0.2mL、0.5mL、0.8mL、1.0mL标准储备溶液至10mL容量瓶中，配制成0.1μg/mL、0.2μg/mL、0.5μg/mL、0.8μg/mL、1.0μg/mL 5种浓度的工作溶液。每個工作溶液测定3次，用最小二乘法拟合浓度-峰面积曲线，用于定量提取液中腐霉利浓度。
2 建立数学模型
式中W-试样中腐霉利的残留量，mg/kg；C-定容液中腐霉利的浓度，μg/mL；V1-萃取溶剂体积，mL；V2-净化用上清液体积，mL；V3-定容体积，mL；-回收率校正因子；m——试样量，g。
3 不确定度分量的主要来源
图1 不确定度分量的主要来源
3.1 标准溶液校准过程引入的不确定度
主要包括购买的标准物质校准值、标准储备液稀释过程、标准工作溶液配制过程以及拟合标准工作曲线过程所引起的不确定度。
3.2 样品质量引入的不确定度
主要由称量所用电子天平的最大允许误差构成。
3.3 体积引入的不确定度
主要包含移取萃取溶剂体积V1、移取净化用上清液体积V2、移取定容体积V3以及上机进样体积V4的不确定度分量组成。
3.4 样品前处理过程引入的不确定度
样品前处理过程繁琐，需经过均质、萃取、净化、浓缩等多步，每步都会引入不确定度，但却难于定量每步对不确定度的贡献，评定不确定度的文献[7-11]一般采用方法加标回收率、精密度等数据来计算此过程引入的不确定度问题，本文采用加标回收率进行评定。
3.5 随机效应引入的不确定度
主要包括样品均匀性和代表性、称量天平、体积、进样的重复性、质谱仪分辨率、读数等因素引起的不确定度。