王美菊，马 萍
(天水市动物疫病预防控制中心，甘肃 天水 741000)
禽白血病(avian leucosis，AL) 是由禽白血病病毒(Avian Leucosis Virus，ALV)引起的家禽传染性肿瘤性疾病的统称，在国外已有一百多年的流行历史，自20 多年前传入我国，目前各地地方品系的鸡和进口的鸡几乎都受到禽白血病病毒不同程度的感染。该病毒可通过垂直和水平两种途径传播，传染性强。鸡感染该病毒后，可造成多组织、多器官发生肿瘤，甚至引起死亡。患病鸡还表现为形体消瘦、发育迟缓，蛋鸡发病后会出现生产性能下降，如产蛋率下降，蛋品质变差，另外产蛋初期和高峰期的蛋鸡具有较高的阳性率[1]。肉鸡感染该病后，由于发生白血病肿瘤，导致死亡率明显升高[2]。禽白血病属于免疫抑制性疾病，鸡感染后会出现免疫力下降，对其他疾病的抵抗力降低；
另外，患病鸡对疫苗的应答能力减弱，从而引发免疫失败[3]。近年来，由禽白血病造成的经济损失逐年增加，成为危害养鸡业的主要疾病之一。为了解该病毒在甘肃省天水市的流行情况，本研究对近2 年来天水市养殖密集区的鸡场进行流行病学调查，为该病的净化和有效防控提供参考。
1.1 材料
1.1.1 检测样品
2020 年10 月至2021 年5 月选取天水市秦州区、麦积区、武山县、甘谷县和秦安县5 个主要养鸡县区，从每个县区中随机抽取存栏5 000 羽以上的规模化鸡场4～6 家，合计24 家，每家鸡场随机采集鸡泄殖腔拭子20 份，共计480 份。
1.1.2 主要仪器试剂
荧光PCR 仪为ABI 公司生产的Thermofisher 7500 Real-Time 定量PCR 仪，A Ⅱ级生物安全柜选用上海力康医疗设备有限公司生产的HFsafe-1200LC；
禽白血病病毒实时荧光PCR 检测试剂盒、柱式DNA 核酸提取试剂盒均购自哈尔滨世纪元亨生物药业有限公司。
1.2 方法
利用吸附柱法提取禽白血病病毒DNA，以提取的DNA 为模板配制PCR 反应体系。反应体系为20 μL：无菌无核酸酶水5.9 μL，PCR 反应液10 μL，荧光探针2.1 μL，模板DNA 2 μL。反应条件为：95 ℃ 2 min；
循环95 ℃ 5 s，60 ℃ 35 s，共40 次，每次循环的第二步(60 ℃ 35 s)收集荧光信号。
2.1 天水市规模化鸡场鸡禽白血病荧光PCR检测
天水市规模化鸡场鸡禽白血病荧光PCR 检测结果见表1。在本次抽检的24 个场中，阳性鸡场为18 家，鸡场阳性率为73.33%；
在采集的480 份样品中，阳性样品共203 份，样品阳性率为42.29%。其中秦州区、武山县和甘谷县的阳性鸡场比例最高，达80%，样品阳性率也较高，分别为57.5%、47.5%和42.5%；
秦安县阳性鸡场比例为66.67%，阳性率也较高，但样品阳性率最低，为25.83%。结果表明，天水市规模化鸡场禽白血病的流行相当普遍，抽检的5 个县区都有禽白血病流行，且5 个县区的鸡场阳性率和样品阳性率都存在显著差异。
2.2 不同种类鸡禽白血病感染情况
不同种类鸡禽白血病感染见表2。由表2可知，在禽白血病的感染率上，24 家规模化鸡场不同用途鸡存在差异，蛋鸡的感染率为38.33%，肉鸡的感染率为54.17%，蛋鸡的感染率明显低于肉鸡的。
本次调查发现，天水市规模化鸡场普遍存在禽白血病流行现象，73.33%的规模化鸡场存在禽白血病病毒污染，且天水市主要养鸡区的5 个县区的规模化鸡场都具有较高的禽白血病的感染率，且集中在60%～80%之间。天水市肉鸡饲养规模小，约占全市养鸡规模的四分之一，但从调查数据可以看出，肉鸡的禽白血病感染率明显高于蛋鸡的，与文献报道的其他地区的感染情况相似[4-6]。
目前，针对禽白血病的预防和治疗尚无商品化的疫苗和有效药物，各国主要通过检测禽白血病病毒以及淘汰带毒种鸡控制该病[7]。天水市的养鸡方式主要以中小规模鸡场为主，存在资金短缺、经营管理水平不高以及防疫体系不健全的缺点[8]。结合禽白血病的流行特点，建议规模化鸡场从以下几个方面着手，防止禽白血病的侵入、传播和流行，实现该病的防控：一是加强引种，阻断病毒的传染源。研究表明，种鸡感染ALV 后能显著影响商品代蛋鸡的生产性能[9]。二是加强生物安全，健全防疫制度，提高鸡场、鸡舍及周边地区的卫生条件，完善消毒体系，合理改造鸡舍的设施设备，以减少鸡群与禽白血病病毒的接触，避免病毒污染饮水、饲料和用具等，从而切断传播途径。三是合理饲喂，减少鸡的应激反应，增强它们的体质，提高鸡自身免疫力，减少易感动物。研究表明，采用免疫增强剂——黄芪多糖能促进鸡的免疫器官发育，增强免疫功能[10-11]。
天水市规模化鸡场禽白血病感染范围广，几乎遍布大多数规模化鸡场，且感染率高。大部分规模化鸡场对禽白血病的特点和危害性认识不足，饲养期的前期表现出的亚临床症状没有引起规模化鸡场兽医的重视，饲养期的中后期一旦发病，所产生的经济损失不可挽回，因此畜牧兽医主管部门应加强对禽白血病流行特点和防控知识的宣传，同时对禽白血病的净化迫在眉睫。
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