王卫强
天津市西青区妇女儿童保健计划生育服务中心检验科 300380
子痫前期(PET)是一种妊娠特异性综合征，其特征是妊娠20周后出现高血压和蛋白尿[1]。流行病学数据显示，全球范围内有3%～14%的妊娠出现PET，美国有5%～8%的妊娠发生PET[2]。约75%的病例病情轻微，而约25%的病例病情严重。在正常妊娠期，子宫动脉的血流阻力随着妊娠期的增加而降低，这是由于螺旋动脉的滋养细胞浸润及其转化为低阻力血管所造成的；
滋养细胞浸润不良是PET发生的病理生理学基础。然而，PET不仅可导致胎盘血液灌注不足，同时可引发其他妊娠相关并发症，如胎儿宫内生长受限(IUGR)和早产(PTD)等。因此，如何早期识别PET风险并进行有效的干预是降低PET导致的相关并发症的关键[3]。
文献报道TLR4及NF-κB在PET患者胎盘组织中表达水平明显升高，而在正常妊娠孕妇中期阳性表达率较低[4-5]。说明TLR4及NF-κB在PET发生发展中可能发挥了重要作用。Faas等人在动物模型输注低剂量的内毒素LPS，能够导致高血压、蛋白尿等症状，从而出现典型PET症状并证实TLR4 在其中发挥了重要作用[6]。NF-κB为核因子，是重要的氧化酶系统因子并参与PET的发病过程[7]。但关于外周血中TLR4、NF-κB升高是否与PET发生有关，并可作为诊断的血清学标志物鲜有报道。本文中采用回顾性分析方法探讨TLR4与NF-κB在PET患者血清中的表达及其作为血清标志物诊断PET的临床价值。
1.1 病例资料 回顾性分析我中心2019年11月—2021年10月收治的PET患者(PET组)31例和健康孕妇(对照组)33例的资料。PET纳入标准：(1)年龄18～40周岁；
(2)PET诊断明确；
(3)单胎妊娠；
(4)PET患者临床资料完整。排除标准：(1)原始病历数据不完整；
(2)双胎或多胎妊娠；
(3)合并乙肝等传染病；
(4)未进行TLR4与NF-κB检查者。
1.2 方法
1.2.1 人口学特征收集：在我院病历系统中调阅符合纳入条件PET患者的相关数据，相关数据采集包括：(1)PET患者人口学特征，如年龄、孕产次、民族、学历等；
(2)患者生活史，如吸烟史、饮酒史等；
(3)病生理史，如既往高血压、糖尿病等病史；
(4)临床化验数据，如血清TOLL受体4与核因子κB水平等。上述数据采用双人摘录，并进行交叉核对校验。
1.2.2 赋值方法：设是否发生PET的变量Y，(Y=0, 未发生PET，Y=1，发生PET)，设可能影响PET发生的因素自变量为X，分别对相关因素进行赋值，PET发生的可能危险因素，自变量设置为X=1，PET发生的可能保护因素设自变量X=0进行赋值，具体赋值方法见表1。
表1 PET相关因素Logistic回归赋值方法
2.1 单因素分析PET相关因素 单因素分析提示，与PET有关的因素为年龄(OR=2.12,P<0.05)、吸烟史(OR=5.32,P<0.05)、饮酒史(OR=4.79,P<0.05)、流产史(OR=2.40,P<0.05)、血清TLR4(t=6.327,P<0.05)及NF-κB(t=6.438,P<0.05)水平，见表2。
表2 单因素分析PET相关因素
2.2 Logistic回归分析PET独立危险因素 Logistic 回归分析显示，高龄产妇(OR=1.88，P<0.05)、饮酒史(OR=1.67，P<0.05)、高血清TLR4(OR=2.11，P<0.05)及NF-κB(OR=2.23，P<0.05)水平是PET的独立危险因素。
2.3 PET患者血清TLR4与NF-κBp水平 PET患者血清TLR4与NF-κBp水平分别为(3.71±1.31)ng/ml和(158.24±45.78)ng/ml显著高于对照组(2.01±0.76)ng/ml和(94.23±33.12)ng/ml，且差异有统计学意义(P<0.05)，见图1。
图1 PET患者血清TLR4与NF-κBp水平散点图
2.4 PET患者血清TLR4与NF-κBp相关性 Pearson相关检验显示，PET患者血清TLR4与NF-κBp存在明显的正相关(r=0.35,P<0.05)，见图2。
图2 PET患者血清TLR4与NF-κB相关性散点图
2.5 血清TLR4与NF-κBp诊断PET价值 分别以血清TLR4和NF-κB为参考指标诊断子痫前期的敏感性分别为72.1%和78.2%，特异性分别为69.2%和72.4%。诊断的ROC曲线下面积分别为0.86(95%CI:0.76～0.96)和0.87(95%CI:0.77～0.98)，见图3。
a b
临床流行病学研究显示，PET发病率在所有妊娠中占3%～14%[8]。然而，PET发病确切的分子机制仍未完全明确，大多数研究认为其可能与孕妇体内炎症因子导致的胎盘血管阻力增高有关[9]。其发病机制包括血管痉挛、血管内皮细胞激活、血管舒张因子减少等有关[10]。
近期有文献报道TLR4参与介导的炎性反应可能与PET有密切的关系[11]。赵先兰等人[12]应用免疫组织化学法分别检测60例PET患者及正常孕产妇胎盘中TLR4的表达情况。研究显示PET患者胎盘组织中TLR4蛋白的表达水平、高于正常晚孕妇女(P<0.05)。研究认为TLR4表达增高与PET发病密切相关，可能是PET的发病机制之一。本文结果也证实PET患者外周血中水平显著高于健康孕产妇，提示TLR4可能参与了PET发生的病生理过程。文献报道NF-κB为核因子，与氧化酶系统等共同参与PET的发病过程。王艳丽等人[4]选取50例PET患者，采用免疫组化及逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)法测定胎盘组织中NF-κB的表达，结果PET胎盘组织中NF-κB蛋白和mRNA的表达水平均明显高于正常晚孕妇女，与本文结果一致。
本文结果提示，经单因素分析PET有关的因素为年龄、吸烟史、饮酒史、流产史、血清TLR4及NF-κB水平升高，说明上述因此可能与PET的发生有关。进一步的Logistic 回归分析显示，高龄产妇、饮酒史、高血清TLR4及NF-κB水平是PET的独立危险因素。Pearson相关检验显示，PET患者血清TLR4与NF-κBp存在明显的正相关(r=0.35)；
分别以血清TLR4和NF-κB为参考指标诊断PET的敏感性分别为72.1%和78.2%，特异性分别为69.2%和72.4%。诊断的ROC曲线下面积分别为0.86和0.87。因此，本研究认为，高龄、饮酒史及血清TLR4和NF-κBp升高是孕妇发生PET的独立危险因素，血清TLR4和NF-κBp蛋白水平可作为诊断PET的血清学标志物。
但研究结论也存在一定的局限性，纳入的PET患者为31例，样本量相对较小，统计学效能不高；
其次，单纯以TLR4和NF-κB为参考诊断PET的敏感性和特异性不高。因此，后续应进行多中心前瞻性研究，进一步明确TLR4和NF-κB在PET发生中的作用及可能分子机制。