唐光怀 苏文旗 韦界平 韦东力
（1广西巴马县动物疫病预防控制中心，广西河池 547500；
2广西巴马甲篆镇水产畜牧兽医站，广西河池 547500；
3广西巴马凤凰乡水产畜牧兽医站，广西河池 547500；
4河池市动物疫病预防控制中心，广西河池 547000）
猪蓝耳病是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)变异株引起的一种急性高致死性疫病，猪圆环病毒病是由猪圆环病毒2型引起猪的一种多系统功能障碍性疾病，临床上二者常混合感染，并引起以高烧持续不退、呼吸急促等为主要临床症状的疾病。其特点是传播迅速，死亡率高，给养殖户造成巨大的经济损失。现将一起猪蓝耳病病毒与圆环病病毒混合感染的诊疗情况报告如下。
广西壮族自治区巴马县某养猪场于2021年5月初分别从外地购入后备母猪、仔猪共150头，最后一批12头于6月29日从市场购买，全场猪乃体重大小不等，最大的有60 kg，最小的20 kg。猪购入时未发现任何异常，畜主主要采用酒店泔水加商品颗粒料饲喂。2021年7月8日，该场的猪突然发病，最后入场的猪开始出现食欲不振、体温升高、皮肤发红等症状，11日出现死亡，疫病很快波及全场，畜主对发病猪紧急使用头孢、黄芪多糖等药物治疗，未见好转。至19日病猪乃死亡59头，死亡率为39.3%(59/150)。
病猪体温39～41.2℃、嗜睡、扎堆；
食欲减退、精神沉郁、眼结膜炎、眼睑水肿、皮肤发红；
严重者食欲废绝、呼吸急促、困难；
口、鼻、双耳及四肢末端皮肤发绀或苍白；
鼻孔流脓性分泌物、咳嗽、腹式呼吸；
尿黄、粪便干燥、逐渐消瘦、病程后期猪后躯无力卧地不起，个别小猪出现水样腹泻、贫血、黄疸。
对该场2头病死猪进行剖检，病理变化主要表现为：胸腔、腹腔内有大量浑浊液体，全身淋巴结肿大出血，切面外翻；
肺脏呈弥漫性黄竭色，按压无弹性，气管和支气管内有大量泡沫状血样渗出物。心脏包膜增厚积水、柔软，心肌出血；
肝脏呈黄色；
脾脏肿大，表面及边缘有少量梗死灶；
肾脏肿大、苍白，表面有小米粒大出血点，质地变脆；
膀胱黏膜有出血点，肠道黏膜可见不同程度的出血。
4.1 实验室检测
4.1.1 样品
无菌采集病死猪肝脏、脾脏、淋巴结、扁桃体等样品送广西河池市动物疫病预防控制中心进行实验室检测。
4.1.2 试剂
猪繁殖与呼吸综合征通用型与猪瘟通用型双重实时荧光RT-PCR检测试剂盒，购自哈尔滨国生生物科技股份有限公司；
猪圆环病毒2型和猪伪狂犬病毒gE基因双重实时荧光PCR检测试剂盒，购自北京世纪元亨动物防疫技术有限公司；
TGuide S32磁珠法病毒DNA/RNA提取试剂盒，购自天根生化科技(北京)有限公司。
4.1.3 检测方法
猪繁殖与呼吸综合征通用型与猪瘟通用型双重实时荧光RT-PCR检测：参照TGuide S32磁珠法病毒DNA/RNA提取试剂盒说明书，提取组织样品中的RNA；
按照猪繁殖与呼吸综合征通用型与猪瘟通用型双重实时荧光RT-PCR检测试剂盒说明书配置反应体系。反应体系为：50℃15 min；
95℃ 2 min；
循环95℃ 15 s，60℃ 30 s，循环 40次，25℃10 s，分别收集荧光信号。
猪圆环病毒2型和猪伪狂犬病毒gE基因双重实时荧光PCR检测：参照TGuide S32磁珠法病毒DNA/RNA提取试剂盒说明书，提取组织样品中的DNA，按照猪圆环病毒2型和猪伪狂犬病毒gE基因双重实时荧光PCR检测试剂盒说明书配置反应体系。反应体系为：95℃2 min；
循环95℃5 s，60℃35 s，循环40次，每次循环的第二步(60℃35 s)分别收集荧光信号。
4.2 实验室诊断结果
猪繁殖与呼吸综合征通用型与猪瘟通用型双重实时荧光RT-PCR检测结果：经荧光RT-PCR检测，按照猪繁殖与呼吸综合征通用型与猪瘟通用型双重实时荧光RT-PCR检测试剂盒说明书的判断标准进行结果判断。检测样品中出现高致病性猪蓝耳病毒核酸特异性荧光曲线，结果为阳性，结果如图1所示；
检测样品中未出现猪瘟病毒核酸特异性荧光曲线，结果为阴性。
图1 高致病性猪蓝耳病病毒荧光RT-PCR检测结果
猪圆环病毒2型和猪伪狂犬病毒gE基因双重实时荧光PCR检测结果：经荧光PCR检测，按照猪圆环病毒2型和猪伪狂犬病毒gE基因双重实时荧光PCR检测试剂盒说明书的判断标准进行结果判断。检测样品中出现猪圆环病毒2型核酸特异性荧光曲线，结果为阳性，结果如图2所示；
检测样品中未出现猪伪狂犬病毒gE基因核酸特异性荧光曲线，结果为阴性。
图2 猪圆环病毒2型荧光PCR检测结果
4.3 最终诊断结果
实验室检测发现病料中猪蓝耳病病毒变异株与猪圆环病病毒2型为阳性，猪瘟、猪伪狂犬病病毒为阴性。根据发病情况、临床症状、病理变化、实验室检验诊断为蓝耳病病毒、猪圆环病毒混合感染。
5.1 加强消毒
对病死猪进行无害化深埋处理。及时清理猪舍粪便，堆积发酵，在猪舍入口处，增设消毒池，定期换水加药；
环境、场区及圈舍用“强力5号”消毒药1∶300进行喷雾消毒，每天1次，连续1周，以后每周1次。全场紧急使用蓝耳病变异株疫苗免疫。
5.2 改善饲养管理
降低猪群的饲养密度，改变饲喂方式，由原来饲喂的酒店泔水加全价颗粒料改为清淡适口的青饲料和玉米粥。
5.3 对症治疗，提高机体免疫力
在饮水中添加氟苯尼考、黄芪多糖、多西环素连用3 d；
病猪上午用20%“穿心莲”+10%“泰灭净钠”注射液，0.08 mL/kg肌肉注射，下午用“地亚净”0.08 mL/kg肌肉注射，连续注射3 d。
治疗3 d后，除严重的11头病猪死亡外，其余80头逐渐恢复食欲。1周后回访，发现猪群精神、食欲恢复正常。此次猪场发病经采取综合防治措施后，治疗病猪91头，治愈80头，治愈率87.9%，控制了疫情。
6.1 疫病发生与畜主的关系
从整个疫病发生和发展情况来看，畜主最后一次引进的12头猪乃很可能在购买之前就感染了疫病，加上运输过程中的应激影响，加快了病情的发展。此外，畜主在调运过程中未能有效地做好猪乃的应激管理，猪乃到场后，未及时向当地畜牧兽医部门报检，未能在技术人员的指导下做好猪乃的隔离观察、环境卫生的消毒及饲养管理。同时没有防疫措施、管理混乱、不注重免疫，且未进行猪圆环病毒疫苗免疫，最终造成了疫病的发生和蔓延。
6.2 提高畜主的疫病防控意识
猪乃在夏季高温湿热的环境下，采食量减少、生产性能下降、机体免疫力受抑制、抗病力也会下降，需要对猪群进行针对性的保健用药，在日粮或饮水中适量添加抗热应激药物，同时保持猪舍通风良好，有条件的养殖场可使用湿帘、冷风机等设施对猪舍进行散热[1]。养殖场主应提高疫病防控意识，完善饲养和防疫设施，加强饲养管理。建议养殖人员在饲喂过程中采用饲料全进全出的养殖模式，规模养殖场实行封闭式管理，控制猪场内人员的进出。猪群应按照不同的生长情况进行分群饲养，同时要创造良好的饲养环境，保持猪舍的清洁舒适，通风良好。
6.3 转变畜主饲养意识
猪场发生疫病前，畜主使用酒店泔水加少许颗粒料混喂，猪乃不但容易发生沙门氏菌、大肠杆菌等细菌感染，而且由于病原体寄生在猪的体内，还可造成多种人畜共患病。此外，泔水还可能导致猪乃患各种寄生虫、真菌、霉菌等传染疾病[2]。泔水喂猪虽然能节约成本，但危害极大，风险极高，因此，养殖场主最好不使用泔水喂猪。饲喂的饲料应根据实际生产情况，按照猪乃达到的生产水平、健康状况、饲养管理、气候变化等因素合理调整，要在保证其质量安全合格达标的情况下因地制宜地使用本地现有饲料资源。同时，在饲料选购的过程中除注重成本外还要注意确保饲料的营养健康，严禁饲喂霉变饲料和餐厨剩余物，做好有害微生物的控制，保障猪乃健康生长。
6.4 建立生物安全意识
建立健全猪场的生物安全制度，防止外界疫病的传入，同时，通过严格的卫生消毒措施把场内的病原微生物污染降到最低，最大限度控制和降低猪群的疫病感染概率。对发病猪群要立即采取严格的隔离措施，加强猪场内环境、场区、圈舍等的消毒和带猪消毒。生产区入口处应设有专门的消毒间或消毒池，用于进入生产区人员及车辆的日常消毒[3]。养殖场应建立隔离区，用于病猪的隔离治疗以及引进猪乃的隔离观察，减少来自猪场内疫情向外扩散和外界疫病的干扰。
6.5 定期开展疫病监测
养猪场应定期对猪乃进行疫病监测，及时掌握猪乃的疾病感染状态，以便及时开展预防及治疗。同时，对各个不同阶段的猪群进行采样，开展免疫抗体监测，根据抗体监测结果科学地设计该猪场的免疫程序或调整正在进行的免疫程序，严格按程序免疫接种，重点做好猪瘟、猪蓝耳病、口蹄疫、猪伪狂犬病、猪链球菌病等的免疫工作，确保免疫效果。
6.6 做好疾病的治疗及病猪的处理
当猪场发生疫病时，及时隔离治疗，不盲目用药，要从疫病的流行特点、临床症状、病理变化和实验室检验等多方面进行综合诊断，针对猪群感染的病毒，选择最佳的治疗方案控制疫病的流行。对于猪蓝耳病、猪圆环病毒2型病等病毒性繁殖障碍疾病的防治主要采取综合防治措施，加强环境消毒，隔离淘汰病残猪，清除病毒和带毒猪，对猪场进行彻底的消毒，加强猪场生物安全措施，切断病毒传播途径。加强对引进猪的检疫，坚持自繁自养、全进全出、分批饲养的管理模式[4]。对病死猪严格进行无害化处理，要严格实行“五不准一处理”，即对病死猪一律不准宰杀、不准出售、不准食用、不准转运、不准乱弃，就地进行深埋无害化处理，防止疫病传播。
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