浸卵法测定甘肃省梨小食心虫田间种群对8,种杀虫剂的敏感性

刘月英, 周昭旭*,, 张美娇, 曹利军

(1. 甘肃省农业科学院 植物保护研究所/甘肃省农业害虫天敌工程研究中心,兰州 730070;
2. 北京市农林科学院植物保护研究所,北京 100097)

梨小食心虫Grapholita molesta(Busck)简称梨小,又名桃折梢虫、东方蛀果蛾,是一种严重危害桃、梨等果树的世界性蛀果类害虫[1-2],更是为害我国北方地区果树生产的重要害虫[3],在多果树混栽区发生为害尤为严重[4]。甘肃省由于充足的光热资源,盛产梨、苹果、桃、李、杏等多种水果,河西走廊已成为梨的重要栽培片区,但是,近年来梨小食心虫危害严重,梨的产量损失达30%~70%以上。

梨小食心虫作为一种钻蛀性害虫,整个幼虫期均在果实或新梢中为害,而幼虫期的化学防治难以发挥有效的作用,卵期和成虫期是防治的关键时期[5-6],其中卵期作为梨小食心虫药剂防治的关键时期之一,曾被广泛推广[7-8]。近些年,由于长期不合理、频繁地使用化学农药,导致梨小食心虫已经产生了抗药性[9]。为明确甘肃地区梨小食心虫种群对常用化学与生物农药的抗性水平,本研究采用浸渍法处理梨小食心虫卵,对甘肃地区梨小食心虫田间种群进行了杀虫剂敏感性测定,以期为果园科学合理用药防控梨小食心虫及害虫抗性治理提供科学依据。

1.1 供试害虫

梨小食心虫G. molesta敏感品系来自西北农林科技大学植物保护学院,为室内长期饲养的梨小食心虫种群,成虫用体积分数为5%的蜂蜜水补充营养,幼虫以人工饲料进行饲养,长期不接触任何杀虫剂。其他种群采集地和地理坐标见表1。室内用梨果饲养梨小食心虫幼虫,成虫羽化后用5%的蜂蜜水补充营养,选取F1 代健壮饱满、24 h以内所产的卵用于杀虫剂敏感性测定。饲养条件为:温度(26 ± 0.5)℃、相对湿度(RH) 60% ± 10%、光周期15 L : 9 D,光照度4 800 lx。

表1 梨小食心虫种群采集地信息Table 1 Information on collection locations of G. molesta populations

1.2 供试药剂

96%高效氯氟氰菊酯 (lambda-cyhalothrin) 原药 (山东省青岛凯源祥化工有限公司),75%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐 (以下简称甲维盐,emamectin benzoate) 原药 (深圳诺普信农化股份有限公司),95%阿维菌素 (abamectin) 原药 (山东省青岛翰生生物科技有限公司),98%茚虫威 (indoxacarb) 原药 (深圳诺普信农化股份有限公司),92%氯虫苯甲酰胺 (chlorantraniliprole) 原药 (山东潍坊润丰化工股份有限公司)。

60 g/L 乙基多杀菌素悬浮剂 (spinetoram,SC)(美国陶氏益农公司),25 g/L 溴氰菊酯乳油(deltamethyrin,EC) [ 兴农药业 (中国) 有限公司],22.4% 螺虫乙酯悬浮剂 (spirotetramat,SC) (上海悦联化工有限公司)。

1.3 敏感性测定方法

1.3.1 药剂配制 92%氯虫苯甲酰胺原药以N,N-二甲基甲酰胺 (DMF) 为溶剂进行溶解,其余4 种供试原药均以丙酮为溶剂进行溶解,配制成104mg/L (田间种群的处理) 和103mg/L (敏感品系的处理) 的母液,再用含有0.1%吐温80 的蒸馏水稀释,按等比或等差法稀释成5~7 个系列质量浓度,以相应有机溶剂的处理作为对照 (CK),每浓度药液量不少于50 mL。

3 种供试制剂均以蒸馏水为溶剂,采取梯度稀释法配制,以清水作为对照 (CK)。每供试制剂设5~6 个稀释处理,各处理药液量不少于50 mL。

1.3.2 测定方法 采用浸渍法测定梨小食心虫卵对供试药剂的敏感性[10]:选择健壮饱满24 h 以内所产的卵粒,剔除无生命活力的瘪卵及无效卵,制作卵卡,每个卵卡有效卵数量不少于20 粒,重复4 次。将待处理的卵卡放入药剂中浸泡8 s 后,用吸水纸吸取卵卡表面多余的药剂,将卵卡放入干净已灭菌的培养皿中,将培养皿置于(26 ± 0.5) ℃,RH 60% ± 10%、光周期15 L : 9 D,光照度4 800 lx的人工培养箱内,5 d 后检查卵的死亡率。卵粒最终颜色透明仅剩一层薄膜且有小孔为正常存活且已孵化的卵,卵粒变色或变黑未能完成发育及幼虫最终不能脱离卵壳的卵视为死亡卵。

1.4 数据统计分析

采用Probit 软件分析致死中浓度 (LC50) 值及95%的置信区间、斜率及标准误、卡方值 (χ2) 及自由度 (df)。抗性水平参照小菜蛾[11]及水稻褐飞虱[12]的分级标准:抗性倍数 (resistance ratio,RR) ≤5 为敏感;
5 <RR≤10 为低水平抗性,10 <RR≤100为中等水平抗性,RR>100 为高水平抗性。

2.1 梨小食心虫敏感品系对杀虫剂的敏感基线

梨小食心虫敏感品系对8 种杀虫剂的敏感性见表2。根据8 种杀虫剂的LC50值大小及其95%置信区间是否重叠进行分析,梨小食心虫卵对乙基多杀菌素和溴氰菊酯最为敏感,其次是对氯虫苯甲酰胺和高效氯氟氰菊酯,对阿维菌素和甲维盐、茚虫威的敏感性顺次降低,对螺虫乙酯的敏感性最差。

表2 梨小食心虫敏感品系对不同杀虫剂的敏感基线Table 2 The baselines of susceptibility to different insecticides of susceptible G. molesta strain

2.2 梨小食心虫田间种群对杀虫剂的抗性水平

从表3 统计分析结果看,3 个田间种群对乙基多杀菌素的抗性在10.24~14.27 倍之间,均表现为中等水平抗性,对溴氰菊酯的抗性在8.85~11.44倍之间,武威凉州种群表现为低水平抗性,兰州榆中和张掖高台种群均表现为中等水平抗性;
3 个田间种群对高效氯氟氰菊酯、氯虫苯甲酰胺及螺虫乙酯的抗性在18.89~86.62 倍之间,均处于中等抗性水平,其中在武威凉州种群高效氯氟氰菊酯和氯虫苯甲酰胺的活性最高,武威凉州种群对高效氯氟氰菊酯和氯虫苯甲酰胺的抗性倍数要显著低于张掖高台种群和兰州榆中种群对这2 种药剂的抗性倍数,最高RR与最低RR之比分别为3.2和2.3;
对阿维菌素的抗性在99.82~147.69 倍之间,兰州榆中种群表现为中等水平抗性,武威凉州种群和张掖高台种群均表现为高水平抗性;
对甲维盐和茚虫威的抗性在135.19~189.81 倍之间,均处于高水平抗性。

表3 梨小食心虫田间种群对不同杀虫剂的抗性水平Table 3 Resistance levels of field populations of G. molesta to different insecticides

续表3Table 3 (Continued)

目前梨小食心虫防控技术主要包括化学防治、性信息素防治、生物防治和物理防治等,后3 种技术受我国栽培模式和管理技术及产品自身限制,在实际生产上还需进一步完善,化学农药防治仍是梨小食心虫防控应用最普遍的技术[13]。在实际生产中由于长期频繁使用广谱性杀虫剂导致梨小食心虫抗药性不断增加,但目前研究主要是通过农药的室内毒力、室内药效或田间防效来反映农药对梨小食心虫的防治效果以进行高效药剂的筛选[14-18],关于梨小食心虫抗药性检测鲜有报道。及时了解和掌握害虫对药剂的抗性水平及其分布,可以为农药的合理使用和延长重点保护的药剂类别及品种使用年限提供指导和依据[19]。

在本研究供试的8 种药剂中,阿维菌素为抗生素类杀虫剂,甲维盐是由阿维菌素B1 为母体合成的一种新型半合成抗生素类杀虫剂,茚虫威为噁二嗪类杀虫剂,螺虫乙酯为季酸酮类杀虫剂,氯虫苯甲酰胺为双酰胺类杀虫剂,高效氯氟氰菊酯和溴氰菊酯为拟除虫菊酯类杀虫剂,乙基多杀菌素是大环内酯类抗生素杀虫剂。本研究结果显示,梨小食心虫田间种群对阿维菌素、甲维盐、茚虫威和螺虫乙酯的敏感性均较低,抗性风险高,不建议使用;
其对乙基多杀菌素、溴氰菊酯、高效氯氟氰菊酯和氯虫苯甲酰胺较为敏感,其中乙基多杀菌素和溴氰菊酯对梨小食心虫卵的毒杀活性最高,RR<14.3,推荐用于梨小食心虫卵期防治,而高效氯氟氰菊酯和氯虫苯甲酰胺由于其抗性水平普遍处于中等偏高水平,建议尽量少用。

由于梨小食心虫具有特殊钻蛀习性,其幼虫除初孵期及老熟脱果期有数小时暴露在外,绝大部分时间均在果实中蛀食,梨小食心虫仅成虫和卵在外界环境中长时间暴露[20], 故而对其防治的主要时期在卵和成虫期。因此,目前主要通过梨小食心虫成虫和卵来筛选高效药剂,并据此制定出相应的防治技术和规程[21]。目前,针对梨小食心虫幼虫的防治药剂研究很少[14,16,18,22-23]。

杨雪琳等[14]测定了6 种药剂对梨小食心虫卵、老熟幼虫和成虫的室内生物活性,发现乙基多杀菌素和氯虫 • 噻虫嗪对其卵和成虫的防效均最好,是卵和成虫防治的推荐药剂,其次呋虫胺、呋喃虫酰肼也对其卵和成虫有较好防效,但6 种药剂对老熟幼虫的毒杀效果均不理想;
韩慧等[5]通过室内触杀试验,推荐梨小食心虫卵期可采用溴氰菊酯防治,成虫期可采用马拉硫磷防治;
杜恩强等[17]的试验则表明,呋虫胺对梨小食心虫成虫的速效性和杀灭作用均较强,而且呋虫胺及高效氯氰菊酯、阿维菌素不但能直接杀灭成虫,还会对成虫产卵有一定抑制作用;
姜军侠等[24]的试验表明,高效氯氰菊酯对梨小食心虫卵的触杀效果最好;
刘中芳等[25]研究发现,氯虫苯甲酰胺对梨小食心虫卵有很好的防治效果;
宫庆涛等[22]试验表明,氟虫双酰胺、氯虫苯甲酰胺和灭幼脲具有良好的卵/幼活性,能有效降低梨小食心虫初孵幼虫蛀果数量,对老熟幼虫可以抑制其发育变态及繁殖;
庾琴等[16]研究表明,阿维菌素、氯虫苯甲酰胺、高效氯氟氰菊酯和呋虫胺对梨小食心虫初孵幼虫有较强的毒杀活性。陈静等[18]采用室内幼虫接触法和大田试验的结果表明,高效氯氟氰菊酯对幼虫效果较好,甲氨基阿维菌素苯甲酸盐和阿维菌素次之。

以上试验结果说明,尽管由于梨小食心虫卵、幼虫和成虫的形态结构及生理生化功能不同,故而针对其不同虫态的有效药剂也不尽相同,但彼此之间有较大的重复性和一致性,表现为乙基多杀菌素、高效氯氟氰菊酯和氯虫苯甲酰胺等药剂不仅对其卵的效果较好,对成虫和幼虫也均具有不同程度的兼灭作用,且实际生产中卵、幼虫和成虫往往同时发生。梨小食心虫卵的抗药性检测结果从某种程度代表和反映了梨小食心虫群体对药剂的抗性水平,卵对药剂的抗性检测结果是指导果园科学合理用药防控梨小食心虫不可忽略的重要依据。

为了防止梨小食心虫对乙基多杀菌素、溴氰菊酯、高效氯氟氰菊酯及氯虫苯甲酰胺等药剂产生进一步的抗性,延长药剂的使用寿命,建议该地区要严格控制这些药剂的使用次数,避免在同一生长季连续多次使用同一药剂,可与氯虫 • 噻虫嗪、呋虫胺、灭幼脲和呋喃虫酰肼等作用机制不同的药剂轮换使用,同时可以对不同作用机制的农药开展合理混用,并合理选择增效剂,以实现减量增效、延缓抗性发展的目的。

由于抗性监测数据直接关系到害虫抗性治理策略和综合治理体系的制定,今后需对梨小食心虫进行更大范围抗药性监测,明确其抗药性现状,为抗性治理提供科学依据。

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