应俊杰， 应铮峥， 沈颖， 吴晓燕， 吴世军， 张建斌*
(1.仙居县农业农村局，浙江 仙居 317300；
2.浙江省植保检疫与农药管理总站，浙江 杭州 310020；
3.上海盛谷光电科技有限公司，上海 松江 201607)
杨梅[Myricarubra(Lour.)S. et Zucc.]是杨梅目杨梅科常绿果树，原产于中国东南部，是浙江省最主要的特色经济作物之一，其果实可食用部分为高度肉质化的外果皮，呈乳头状密集排列，天然裸露，富含糖分和汁水，风味独特，深受消费者喜爱。仙居县位于浙江省东南山区，属亚热带季风气候，日照充足，土壤有机质含量高，酸碱度适中，杨梅生产环境得天独厚，全县杨梅种植面积9 200 hm2，年产量7.5万 t[1]，为中国杨梅种植第一大县，有“中国杨梅之乡”之称。仙居杨梅一二三产融合联动发展，年度总产值超过10亿元[1]，对促进乡村振兴和实现共同富裕有着重要意义，先后荣获国家地理标志产品、原产地保护标记注册证书及中国驰名商标，并成功创建全国绿色食品原料(杨梅)标准化生产基地[2]，仙居杨梅观光带被评为中国美丽田园。
果蝇是双翅目果蝇科约1 000余种昆虫的统称，其成虫体型较小，身长3～4 mm，分布广泛。危害浙江省杨梅的主要有黑腹果蝇(D.melanogaster)、斑翅果蝇(D.suzukii)、拟果蝇(D.simulans)、高桥氏果蝇(D.takahashii)、伊米果蝇(D.immigrans)和黑果蝇(D.virile)等6种[3]。果蝇世代历期短、繁殖能力强，对成熟水果的酸香味趋性明显，雌成虫可将卵产在即将成熟的杨梅果实表面，幼虫孵化后再钻蛀取食果肉，造成果汁外溢，引起果肉软化以至变褐腐烂，诱发落果，还能传播灰腐病和褐腐病等病菌，严重影响杨梅的产量、品质以及保质期，对晚熟品种和高山杨梅的影响更加严重，有些杨梅主产区的被害果率高达60%以上[4]，是杨梅成熟采摘期最主要的害虫，也是杨梅产业发展中的一个重要制约因素。为提高杨梅品质，科学防控杨梅果蝇，仙居县自2015年开始实施全县整建制杨梅统防统治工作，从源头保障杨梅质量安全。截至2021年8月已登记用于防治杨梅果蝇的农药只有乙基多杀菌素和伊维菌素2种制剂，长期连续使用容易使果蝇产生抗药性。为寻求更多防治杨梅果蝇的高效、低毒、低残留安全农药，探索以菌治虫的生物防治技术，促进统防统治与绿色防控融合，2021年5—6月进行了镇江市润宇生物科技开发有限公司生产的短稳杆菌悬浮剂防治杨梅果蝇田间药效小区试验，以明确该药剂对杨梅果蝇的防治效果、适宜浓度以及对杨梅的安全性等[5]。
1.1 供试材料
试验地点A选择在仙居县福音果业专业合作社(浙江省仙居县福应街道中桥头村)杨梅基地，土壤为洪积砂性壤土，地力等级为4，有机质含量27.4 g·kg-1，全氮含量1.10 g·kg-1，有效磷含量0.24 g·kg-1，速效钾含量0.29 g·kg-1，pH 5.2，供试品种为15～16 a生东魁杨梅盛结果树。试验地点B选择在仙居县果悦种植专业合作社(浙江省仙居县皤滩乡板桥村)杨梅基地，土壤为红粉泥砂壤土，地力等级为5，有机质含量16.8 g·kg-1，全氮含量0.78 g·kg-1，有效磷含量0.02 g·kg-1，速效钾含量0.10 g·kg-1，pH 5.2，供试品种为7～8 a生东魁杨梅初结果树。
两处试验地点分别位于仙居县东部和西部杨梅主产区，具有一定的区域代表性，同一基地内杨梅植株大小、长势以及肥水管理等农事操作措施基本一致，具有较好的可重复性。2个基地历年都有杨梅果蝇发生为害，具备杨梅果蝇防治试验的基础。
供试药剂为100亿·mL-1短稳杆菌悬浮剂，由镇江市润宇生物科技开发有限公司生产；
对照药剂为60 g·L-1乙基多杀菌素悬浮剂，由科迪华农业科技有限责任公司生产。
1.2 处理设计
试验设5个处理：处理1，100亿·mL-1短稳杆菌悬浮剂1 000倍液(1.00×107·mL-1)；
处理2，100亿·mL-1短稳杆菌悬浮剂800倍液(1.25×107·mL-1)；
处理3，100亿·mL-1短稳杆菌悬浮剂600倍液(1.67×107·mL-1)；
处理4，60 g·L-1乙基多杀菌素悬浮剂2 000倍液(30 mg·kg-1)；
处理5，清水对照。每个处理4次重复，共20个小区。每个小区为4株杨梅树，面积约133.3 m2(以300株·hm-2计)。各小区采用随机区组排列，小区间设保护行。
1.3 试验方法
试验采用叶面喷施的方法，间隔7 d连续2次施药。由于100亿·mL-1短稳杆菌为活体细菌农药，为避免杀菌剂干扰，试验期间不同时使用任何杀菌剂。首次施药时间为5月29日(杨梅采前半个月左右，果实开始进入转色期)，晴，西南风1～2级，19～27 ℃，药后48 h无雨；
第二次施药时间为6月5日，晴转多云，东南风3～4级，17～29 ℃，药后48 h无雨。施药器械采用台州富士特 FST-769背负式动力喷雾机(工作压力1.5～2.5 MPa、容量25 L)，对树冠和果实均匀常量喷雾，以叶片正反面、果实和枝条表面润湿为标准。
1.4 调查项目
分别在第二次施药后7 d(6月12日，小雨，24～31 ℃，杨梅采摘初期)和14 d(6月19日，小到中雨转小雨，23～32 ℃，杨梅采摘末期)各调查1次存活的果蝇幼虫数。在每棵调查树的树冠四周及内膛的中上部随机摘取果实10个，共计40个，当天用75%乙醇浸泡20 min后调查各果实存活的幼虫数，计算虫果率和防治效果。同时，观察记录施药后供试药剂对杨梅叶片、枝梢、果实及树势等是否有安全性影响。
药效计算方法：虫果率=虫果数/调查总果数×100%；
防效=(对照区虫果率-处理区虫果率)/对照区虫果率×100%。
1.5 数据分析与处理
采用Excel 2003记录、整理试验数据，并绘制虫口数和虫果率图表。数据不作转换，采用DPS数据处理系统的Duncan′s新复极差法对不同处理的果蝇防效进行统计分析和比较[6]。
2.1 安全性
在本次试验条件下，整个试验期间供试药剂处理后对杨梅叶片、枝梢、果实及树势等均无不良影响，安全性较高。
2.2 防治效果
从图1来看，A、B 2个试验地点的试验结果基本吻合，其中试验地点A的虫口基数较小，与综合使用了黏虫色板和食源引诱剂有关。试验结果表明，各处理施药后7和14 d杨梅果蝇虫口数量和虫果率均极显著区别于清水对照，100亿·mL-1短稳杆菌悬浮剂对杨梅果蝇具有较好的预防控制效果，其效果随药剂浓度增加而上升。
图1 不同处理对杨梅果蝇虫口数和虫果率的影响
从表1可知，施药后7 d，处理B1防效仅80.0%，显著低于处理A1，极显著低于其他各处理，说明100亿·mL-1短稳杆菌悬浮剂 1 000倍液对杨梅果蝇的短期防效已趋向不稳定，在实际生产中应当加大剂量使用；
施药后14 d，处理A3和B3防效与处理A4和B4无显著性差异，说明100亿·mL-1短稳杆菌悬浮剂600倍液与60 g·L-1乙基多杀菌素悬浮剂2 000倍液防效相当，可以在杨梅生产中作为替代、轮换药剂使用；
处理B2防效显著低于处理B4，但与处理A4无显著性差异，处理A2显著低于处理A4，极显著低于处理B3和B4，说明100亿·mL-1短稳杆菌悬浮剂800倍液对杨梅果蝇的长期防效趋向不稳定，为保证长期防效应适当加大剂量。
表1 不同处理对杨梅果蝇防效的影响
100亿·mL-1短稳杆菌悬浮剂是一种从解剖罹病死亡的害虫尸体中分离提取的Empedobacterbrevis菌株经过三级发酵法制造而成的新型细菌型微生物杀虫剂[7]，由镇江市润宇生物科技开发有限公司创制。短稳杆菌经害虫取食进入消化道，损伤中肠组织细胞，并转移到体腔和血淋巴而感染杀死害虫，与其他微生物杀虫剂具有相似的毒杀机理[8]。目前短稳杆菌悬浮剂已在茶树、棉花、十字花科蔬菜、水稻、烟草、芋头6种作物上登记，用于防治茶尺蠖、棉铃虫、小菜蛾、斜纹夜蛾、稻纵卷叶螟、烟青虫等鳞翅目害虫，对草地贪夜蛾也有一定防效[9-10]。近年来，有研究表明，短稳杆菌对美洲斑潜蝇[11]、水稻潜叶蝇[12]等双翅目害虫也有较为理想的防治效果。武海斌等[13]试验结果表明，100亿·mL-1短稳杆菌悬浮剂对樱桃果蝇防治效果达87.4%～92.3%，与本试验结果基本相符，在实际生产中建议使用600倍液树冠喷施来替代、轮换乙基多杀菌素等药剂使用，延缓果蝇抗药性的产生。同时，短稳杆菌在一定范围内与茚虫威[14]、绿僵菌[15]等其他杀虫剂复配具有很高的增效活性，可以扩大防治谱、提升速效性和持效性，值得进一步研究讨论。此外，短稳杆菌被列入食品中农药最大残留限量豁免名单[16]，具有较高的安全性，值得进一步研究其适当推迟使用对杨梅果蝇是否有更好的预防控制效果；
其生产原料以奶粉和食用糖为主，产品施用无化学残留，不会对环境造成污染。综上所述，短稳杆菌具有高效、安全、环境友好等特点，适用于杨梅果园防治果蝇，并能兼治杨梅卷叶蛾、蓑蛾、尺蠖等鳞翅目害虫，可以在实际生产上应用，再结合果园生草栽培、悬挂色板和食诱剂诱杀、捡拾落果等绿色防控措施[17]，能够有效减少化学农药的使用量，延缓害虫抗药性的产生，提升农产品质量安全。
但是短稳杆菌等活菌型生物农药相对于传统化学农药在使用方法上有更高的要求，在推广应用的过程中必须更加注重操作规范，否则容易造成农业生产事故。一方面应注意施药时的天气，杨梅成熟前的高温高湿天气虽然有助于提高短稳杆菌的药效[18]，但是施药后如遭遇暴晒、强降雨等天气则会对药效产生负面影响，施药应选择在清晨、傍晚或阴天白天进行；
另一方面不可与防治细菌性病害的药剂和强酸碱性物质混用，而杨梅成熟前必须同时防治白腐病等挂果期病害[19-20]，如果混配吡唑醚菌酯等在实际生产上广泛应用的广谱型杀菌剂则容易导致药效降低甚至失效；
另外应慎用植保无人机，虽然机器换人的轻简化模式是未来植保的发展趋势[21]，但目前低空低量施药技术对活菌型生物农药的影响缺乏研究，需要谨慎对待；
此外，还需进一步关注生物农药对人体健康、害虫天敌等方面的影响，有研究表明，短稳杆菌会对鳞翅目害虫的寄生型天敌斑痣悬茧蜂(Meteoruspulchricornis)造成一定影响[22-25]。