解冻温度对农药残留的影响探究
摘 要：通过添加相同标样的平行样在不同的温度下解冻对比研究，发现解冻温度对于所检测大部分的参数没有影响，但对甲胺磷、氧化乐果、百菌清、三唑酮、氟虫腈这5种农药的影响较大，在实际工作中，可以根据具体情况进行选择，从而提高工作效率。
关键词： 解冻温度；农药残留
中图分类号： S481.8 文献标识码：A DOI：10.11974/nyyjs.20160532015
在实际工作中，制备好的样品常常被放置在-18℃的冰箱里保存，待用时，需出解冻。而放置在常温下解冻的样品，常需要2～3h左右，影响工作效率，故本实验设置样品在不同温度下解冻，并对结果进行对比分析，探究解冻温度对结果是否会有影响。
1 实验部分
1.1 材料与仪器
供试农药标样：农业部农药检定所提供；
试剂：正己烷（色谱纯）、丙酮（色谱纯）、乙腈（色谱纯）、氯化钠（分析纯）；
主要仪器：气相色谱仪（Agilent 7890A）、氮吹仪、匀浆机等；
分析项目：甲胺磷、甲拌磷、乐果、地虫硫磷、马拉硫磷、对硫磷、水胺硫磷、三唑酮、百菌清、氟虫腈、甲氰菊酯、氯氰菊酯、溴氰菊酯、氰戊菊酯、乙烯菌核利、腐霉利、异菌脲、联苯菊酯、氯氟氰菊酯、哒螨灵、氟氯氰菊酯、氟氰戊菊酯、氟胺氰菊酯；
标样浓度：浓度均为1000mg/L，配成32mg/L的混标溶液备用。
1.2 实验设计
实验分为3组，A组、B组、C组，每组为3个平行样，解冻温度分别为A组室温（20～25℃）、B组50℃、C组80℃。本次试验为确保结果的准确性，由同一人做3次的平行试验、及由3名不同的实验人员各做1次试验，最后的结果是由6次试验的平均数值得出。
1.2.1 试料制备
取黄瓜可食用部分，用干净纱布轻轻擦去样品表面的附着物，采用对角线分割法，将其切碎，充分混匀放入食品加工器粉碎，制成待测样，分别放入塑料容器中，编号，备用。
分别称取9份25.0g的试料放入三角瓶中，各添加32mg/L的混标溶液0.08L，摇匀封上封口膜后，放置冰箱中于-18℃保存，过夜。注意，有机磷类的农药对在ECD上出峰的时间与三唑酮有相重复的地方（具体见图1），故加标时，需分开。
第2天，取出，分别放置在室温（A组）、50℃的水浴锅（B组）、80℃的水浴锅（C组）中解冻。当解冻至90%左右时，可以取出，利用余温解冻完全。其中A组解冻时间为1h，B组解冻时间为0.5h，C组解冻时间为0.2h。
1.2.2 提取
待完全解冻后，再分别加入50.0mL乙腈，在匀浆机中高速匀浆2min后用滤纸过滤，滤液收集到装有5～7g氯化钠的100mL具塞量筒中，收集滤液30～40mL，盖上塞子，剧烈震荡1min，在室温条件下静止30min，使乙腈和水相分层。
1.2.3 净化
有机磷类：从100mL具塞量筒中吸取10.0mL乙腈溶液，放入150mL烧杯中，将烧杯放在80℃水浴锅上加热，杯内缓缓通入氮气流，蒸发近干。加入2.0mL丙酮溶解，完全转移至10mL刻度试管，定容至5.0mL，摇匀待测。
有机氯、拟虫菊酯类：从100mL具塞量筒中吸取10.0mL乙腈溶液，放入150mL烧杯中，将烧杯放在80℃水浴锅上加热，杯内缓缓通入氮气流，蒸发近干，加入2.0mL正己烷。将弗罗里硅土柱依次用5.0mL丙酮和正己烷（10+90）、5.0mL正己烷预淋洗，条件化，当溶剂液面到达柱吸附层表面时，立即倒入上述待净化溶液，用15mL刻度离心管接收洗脱液，用5mL丙酮+正己烷（10+90）冲洗烧杯后淋洗弗罗里硅土柱，并重复1次。将盛有淋洗液的离心管置于氮吹仪上，在水浴温度50℃条件下，氮吹蒸发至小于5mL，用正己烷定容至5.0mL，在漩涡混合器上混匀，装入小瓶中，待测。
1.2.4 标准溶液的配制
有机磷、有机氯及拟虫菊酯类定量采用校准线外标法定量。准确移取65μL标样液于10mL容量瓶中，再分别配制成浓度为0.208mg/L、0.156mg/L、0.104mg/L、0.078mg/L、0.052mg/L 的标样标准曲线。其中，有机磷标样用黄瓜基质配制。以标样进样浓度C（ug/L）为横坐标，对应单离子色谱峰面积A为纵坐标绘制标准曲线，相关系数R2 在（0.9993～0.9999）范围内，均呈现正相关系。
1.3 测定
1.3.1 上机测定参考条件
FPD检测器：
色谱柱：75%苯基-25%甲基聚硅氧烷（Agilent生产的 DB-17）柱，30m×320um×0.25um；
进样口温度：250℃ 检测器温度：250℃；
柱温：90℃-1min-1min；10℃/min-180℃-0min-1min； 1℃/min -205℃-0min-35min；10℃/min-255℃-10min-50min；
气体及流量：氮气（60mL/min，纯度≥99.999%） 氢气（75mL/min，纯度≥99.999%） 标准空气（100mL/min）；
进样方式：自动进样 进样量：1μL。
ECD检测器：
色谱柱：苯基甲基二甲基聚硅氧烷（Agilent生产的HP-5）柱，30m×320um×0.25um；
进样口温度：250℃；检测器温度：300℃；
柱温：90℃-1min-1min；30℃/min-170℃- 1min- 4.6667min；8℃/min-230℃-0min-12.167min；2℃/min-
250℃-0min-22.167min ；3℃/min- 275℃- 5min -35.5min；