[摘要] 目的 乙型肝炎病毒(HBV)感染是一个十分严峻的问题，其感染者在不少行业、岗位受到限制，因此，乙肝表面抗原(HBsAg)检测的准确性对不少受检者来说至关重要，同时乙肝表面抗原(HBsAg)的检测也对乙型肝炎的早诊断、早治疗，防止交叉感染，避免医患传播具有十分重要的意义。方法 收集570份乙肝表面抗原(HBsAg)在临界值包括低于ELISA法临界值的和高于ELISA法临界值附近的标本，用金标法，ELISA法，电发光法(RIA法)进行比较。结果 ELISA法测得300份血清呈阳性，阳性率52.6%；RIA法测得350血清呈阳性，阳性率61.4%；金标法测得50份血清呈阳性，阳性率8.8%。结论 RIA法对检测乙肝表面抗原(HBsAg)弱阳性的标本有较高的特异性和敏感性，是临床其它方法对乙肝表面抗原(HBsAg)检测为弱阳性进行确诊的较为理想的方法，对临床诊断乙肝病毒感染具有较高的可靠性。
[关键词] HBsAg检测； 弱阳性检测方法可靠性； ELISA法； 金标法； RIA法
[中图分类号] R197.7 [文献标识码] A [文章编号] 1005-0515（2011）-12-343-01
由于乙肝在我国传播面广,特别珠三角地区可达到15%的阳性率，但是，日常工作中部分HBsAg滴度表达很低的标本由于试剂的敏感性、特异性等指标的差异，导致不同方法测定结果有所差异，造成一定程度的误诊和漏诊,甚至引发医患矛盾或医疗纠纷，因此，检测手段的可靠性对控制流行和传播有至关重要的意义。有资料表明,输入血制品的患者中HBsAg阳性的发生率可高达10%以上,因此,筛选HBsAg的检测方法尤显重要。现用目前国内常用的三种检测方法对收集的HBsAg弱阳性标本进行测定，并对结果进行分析比较，现报告如下。
1 材料与方法
1.1 标本来源 选取2007年7月-2008年5月来我体检中心体检的健康人群乙肝表面抗原(HbsAg)ELISA法OD值在0.05-0.30血清标本570份，所有标本经ELISA检测为弱阳性/阳性(报告结果为阳性)或阴性(报告结果为阴性)，及时分离血清于-20℃冰箱保存，标本无黄疸、脂血、溶血现象。
1.2 试剂和仪器 1)试剂：金标法试纸条为艾康生物技术(杭州)有限公司提供，ELISA试剂盒由上海科华生物技术有限公司提供，电发光定量检测试剂为罗氏公司提供的配套试剂。2)仪器：美国热电洗板机和酶标仪(ELASA比色用)及罗氏2010电发光分析仪。
1.3 方法 将标本复温后，分别以金标法试纸条、ELISA试剂盒和电发光检测技术平行检测HBsAg，其中金标法在15分钟和30分钟各观测一次结果，以30分钟报告结果(测定结果应在15分钟内读取，30分钟后判定无效);ELASA测定严格按试剂盒操作说明书操作，分别设空白和阴、阳对照孔，反应终止后于450/630nm双波长测定OD值，结果判断：样品OD值≥2.1*阴性对照平均OD值判断为阳性，否则为阴性，阴性对照OD值低于0.05作0.05计算;电发光定量操作前按要求做好试剂定标工作，并作室内质量控制，依据试剂说明结果大于0.05ng/ml判定为阳性。
2 结果
2.1 所有标本的电发光(RIA法)定量结果 有85.5%位于(0-10)ng/ml区间，11.5%位于(10-20)ng/ml，判断阳性标本共有350份，阳性率为61.4%，均值为3.04ng/ml。
2.2 所有标本用ELISA法测得 OD值0.105-0.31之间的有300份，按照样品OD值≥2.1*阴性对照平均OD值判断为阳性的规定，则此300分血清可判断为阳性，阳性率为52.6%，OD均值为0.156。
2.3 所有标本用金标法测乙肝表面抗原(HBsAg) 30分钟内读取结果，超过30分钟判断无效。仅有50份血清呈现出双线反应(阳性)，阳性率为8.8%，平均出现双线反应(阳性)的时间为24分钟。
2.4 以电发光(RIA法)为标准做统计 金标法和ELISA法测定血清HBsAg弱阳性的诊断指标统计如表：
表 金标法和ELISA测定血清HbsAg低值弱阳性样本的各诊断指标
3 讨论 在临床检验工作中HBsAg测定的方法学不同常常会有不同的结果，从而引起医疗纠纷及临床医师的误解,一般有以下几种情况:1)漏诊和误诊,G金标法检测HBsAg弱阳性样本时造成假阴性;2)金标法和ELASA检测结果为阴性而点发光的检测结果为阳性。这些情况让不了解的临床工作者感到困惑,其实这正体现了电发光(RIA法)在方法学上的优势及在临床诊断上的重要价值，解释了ELISA检测乙肝五项结果为少见模式的标本用电发光(RIA法)复检后多数为常见模式，然而三种方法在临床应用上各有优缺点。金标法检测HBsAg具有简便快速、可单份操作等优点，能满足急诊检验的需要，如为门、急诊病人和无偿献血现场采血前检测HBsAg提供了便利条件，但由于测定灵敏度低于ELASA法加上其成本是ELASA法的4-5倍使金标检测的应用受到一定的限制，为了确保检验结果的准确及临床用血的安全，经金标法初筛测定为HBsAg阴性或可疑弱阳性的的标本仍需用ELASA进行复检，尤其是可疑标本，必要时需要用电发光(RIA法)复查;ELASA测HBsAg无疑是目前应用最为广泛的方法，因为其在各诊断指标都比较理想且成本较低，只需要一台酶标仪，基本满足了临床需求，但随着医学的发展与进步以及患者要求的日益严格，其定性或只能半定量价值显然受到限制;微粒子电发光(RIA法)检测技术检测HBsAg是目前世界上检测乙肝标志物的金标准，它不但灵敏度高且抗干扰能力强，重复性好，并可单份检测，检测时间只需28分钟，但由于仪器昂贵、试剂成本较高在我国应用单位很少，只适用于大型医院开展针对弱阳性或可疑弱阳性标本的检测。由于免疫学技术的不断发展，快速简便低成本的化学发光、电化学发光、荧光免疫技术等新一代检测方法的不断推出，以满足定量检测的要求。HBsAg检测的灵敏度、特异性明显提高，使HBsAg滴度表达很低的标本得以检出，对临床诊断及流行病学调查有着重要意义。
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