【摘要】 对食品中的多种类合成色素进行分级提取净化体系的研究，应用该体系对食品样品进行合成色素成分的测定，可显著提高分析效率，充分证实分级提取净化方法对分析多种合成色素构成的食品具有较强的应用价值。
【关键词】 食品；多种类；合成色素；分级提取净化
目前，食品安全问题成为公众最关注的问题之一，尤其是食品中合成色素的滥用，有些无良企业甚至在食品中添加毒性较大的工业色素，严重危害到人体健康，使人们谈虎色变。我们常用的分析某一类合成色素的方法通常有高效液相色谱法等，但不能同时进行多种类合成色素的分离与净化，故非常有必要研究出一种分离净化体系，能够分析食品中存在的不同种类合成色素的性质。本研究以蛋糕为研究样品，进行了多种类合成色素分级提取和净化体系的探讨。1 材料与方法
1.1 仪器、试剂及材料 仪器：LC-20AT高效液相色谱仪(日本岛津公司)，带紫外检测器；PLGPC-50凝胶渗透色谱仪(英国Polymer公司)；Kromstar TM液相色谱柱(美国Vertex公司)；AND分析天平(日本YMC公司)；SA31振荡器(日本Yamato公司)；TGA-16LA高速冷冻离心机(湖南兴科科学仪器公司)。试剂：盐酸、乙酸、正己烷、环己烷、甲醇-甲酸溶液，氨水(28%-30%)，乙酸铵(0.02mmol/L)，Milli-Q超纯水，合成着色剂标准液：准确称取适量柠檬黄、日落黄、苋菜红、胭脂红、日落黄、酸性红、酸性黄及诱惑红各0.1g，配制储备液（500mg/L）。材料：蛋糕样品共6种由某超市提供。
1.2 操作方法
1.2.1 称取10.0g蛋糕样品，粉碎均匀，加5ml正己烷及5ml水，先行振荡20min，继而以8000r/min的温度离心，分离出正己烷层、水层和残渣。
1.2.2 分离出正己烷层提取液，通过浓缩后以乙酸乙酯-环己烷(1：1)定容为10ml，净化（凝胶渗透色谱）后获得收集液，继续浓缩，乙腈定容为1ml，经滤膜(0.45μm)过滤后备用。
1.2.3 分离出水层加20mL乙腈，先行振荡10min，继而以8000r/min温度离心，分离出25ml乙腈-水层提取液，过滤后浓缩，甲醇定容为5ml，经滤膜（0.45μm）过滤后备用。
1.2.4 取出残渣加15ml氨水（1%），先行振荡10min，继而以8000r/min温度离心后，获得氨水-甲醇溶液，继续浓缩为2ml，甲醇定容为5ml，经滤膜（0.45μm）过滤后备用。
1.3 GPC净化条件 选用TypeS-X3(德国Bio-Beads)GPC净化标准柱；流动相：100%甲醇；进样量：100ul；流速：1.5ml/min；收集时间：24-36min。2 结 果（见表1）
表1 多种类合成色素液相色谱参数及梯度洗脱条件
合成色
素种类 保留时
间（min） 梯度洗脱条件
时间(min) 甲醇A（%） 乙酸铵B（%） 流速（mL/min）
柠檬黄 1.920 0.00 10.0 90.0 0.500
苋菜红 6.194 2.00 10.0 90.0 0.500
胭脂红 7.005 2.10 30.0 70.0 0.500
日落黄 8.239 10.00 30.0 70.0 0.500
酸性红 11.653 12.00 40.0 60.0 0.500
酸性黄 12.069 25.00 80.0 20.0 0.500
诱惑红 12.642 30.00 80.0 20.0 0.500
3 讨 论
在食品多种类合成色素分级提取净化体系中，我们采用正己烷作为第一级的提取剂，采用凝胶渗透色谱可有效分离脂溶性化合物和脂肪，有利于进行下一级净化；采用超纯水作为第二级的提取剂，有助于提取水溶性的合成色素，并分离出蛋白质，采用甲醇-氨水溶液为第三级的提取剂，有助于对合成色素的提取。其中二级及三级提取液可不用经聚酰胺吸附法进行净化处理，可过滤后直接上样分析即可，使以前繁琐的处理程序简单化。本实验以蛋糕为研究分析对象，经正己烷-乙腈水-甲醇氨水体系进行提取与净化处理，形成了多种合成色素成分的分析平台。由于本研究所提取的7种化合物在常用食品添加剂中应用较广泛，故本体系对食品中合成色素成分的筛查有较高的参考性。采用分级提取净化体系对超市提供的6种蛋糕成品进行分析检测，均未发现有合成色素检出。
综上所述，我们认为该分级提取净化体系的优势在于：应用该体系对食品添加剂中多种类合成色素进行有效提取与净化，可显著提高分析效率，充分证实分级提取净化方法对分析多种合成色素构成的食品具有较强的应用价值。
参考文献
［1］ 赵延胜，董英，张峰，等.食品中46种禁限用合成色素的分级提取净化体系研究［J］.分析化学，2012，40（2）：249-256.
［2］ 赵延胜，杨敏莉，张峰，等.液相色谱/四极杆-飞行时间质谱法筛查奶酪中29种禁用和限用合成色素［J］.色谱，2011，29（7）：613-617.