【中图分类号】R651 【文献标识码】A 【文章编号】1672－3783(2012)06－0019－01 【摘要】目的 神经干细胞移植与神经节苷脂合用（GM1）观察两者对脑损伤大鼠恢复中的作用。方法 用健康大鼠制成重型液压颅脑损伤模型，随机分成2组，损伤组(培养液移植组)，神经干细胞+GM1组，脑损伤后24 h、3 d 及伤后1、2、3、4 周行动物神经学缺损评分，在脑损伤后21~28 d 进行Morris 水迷宫试验。结果 移植后1、2、3、4周，大鼠神经学缺损评分及水迷宫测试结果显示，神经干细胞移植可明显改善重型颅脑损伤后大鼠的神经功能，联合应用GM1有协同效果。讨论 神经干细胞移植可明显改善重型颅脑损伤后大鼠的神经学功能，联合应用GM1 有协同效果。
【关键词】 脑损伤 神经干细胞移植 神经节苷脂 神经学功能
神经干细胞(neural stem cells，NSCs)具有自我增殖能力和多向分化潜能，一定条件下可以分化成神经系统的各种细胞。GM1是神经节苷脂的一种，GM1具有明显促进神经细胞修复的作用［1］ 。文章通过GM1治疗联合NSCs移植观察两者对大鼠脑梗死后神经功能恢复的影响。
1、 资料与方法
1.1 一般资料
2008-11/2009-03在天津医科大学内分泌研究所完成此项研究。胎龄约为15 d的Wistar胎鼠12只，清洁级Wistar 大鼠78只，雌雄各半，质量250~300g，购自中国医学科学院动物实验室(动物质量合格证号：SCXK20060007)。实验中对动物处置方法符合动物伦理学要求。
1.2 方法
随机区组法分为2组，每组各39只。200g/L的乌拉坦按1.2 g/kg经腹腔内注射麻醉后，采用液压颅脑损伤仪，按国际通用标准，对各组给予253.312~303.975 kPa峰值的冲击压力，制成重度大鼠液压颅脑损伤模型。损伤后出现自主呼吸暂停者，立即用小动物呼吸机给予面罩吸氧。伤后24 h将大鼠再次麻醉，打开原先骨窗，立体定向注射。
损伤组：注射1mL DMEM/F12培养液组；NSCs+GM1组同法注射等量的NSCs悬液(1×1010 L-1)后经腹腔注射神经节苷脂水溶液(30 mg/kg)1次/d，连续3d。于骨窗边缘分3点注入，每点2μL，深度为硬膜下3.0 mm，留针10 min，缓慢退针，缝合头皮。腹腔注射庆大霉素2000 U抗菌治疗，回笼饲养。
1.3 评估标准
神经功能评估：大鼠运动神经功能评价采用Bederson 等的神经学缺损评分法，在脑损伤后24 h及伤后3 d，1、2、3、4周进行，评分的标准如下：0分，无明显的神经功能缺失；1分，对侧前肢屈曲；2分，提尾时对侧前肢抓力下降；3分，各方向自主运动，但提尾时向左侧旋转；4分，自发性向左侧旋转。评分越低表示神经运动功能恢复越好。
Morris水迷宫试验：在脑损伤后23~28 d进行Morris水迷宫装置检测学习记忆能力。空间定航实验：历时5d半，记录每只大鼠从入水到找到并爬上平台所需的时间，即逃避潜伏期(escaping latency)；空间探索实验：第5天下午撤掉平台，让大鼠在迷宫内自由活动2 min，记录其经过平台原址的次数(times of passing platform)。
1.4 统计学方法
采用SPSS 17.0统计软件进行完全随机设计的方差分析，数据以x±s表示，两组之间的两样本t取教训检验比较用Dunnett t 检验以P
2、 结果
实验选用大鼠78只，随机选取造模成功的60只分为2组，无脱失，全部进入结果分析。神经功能评价2组大鼠不同时间神经学缺损评分，移植后1~4周，大鼠神经学缺损评分NSCs+GM1组明显低于损伤组，差异有非常显著性意义(P